DIAGNOSTICO DE LAS LEUCEMIAS AGUDAS

El estudio fenotípico permite en más del 90% de los casos asignar línea a las células blásticas. En este sentido, los antígenos más específicos son la mieloperoxidasa (MPO) para línea mieloide, el CD79 a citoplásmico para la línea B, y el CD3 citoplásmico para la línea T. (www.citometriadeflujo.com)

Además la detección del antígeno intranuclear TdT permite en las neoplasias linfoides diferenciar los síndromes linfoproliferativos crónicos (TdT negativos) de las leucemias agudas (TdT positivas en la mayoría de los casos)
En las leucemias agudas mieloblásticas (LMA), el estudio fenotípico es vital para el diagnóstico de las LMAs M0 de la FAB , donde junto con la negatividad de la MPO mediante estudio citoquímico (<3%), encontraremos una positividad de MPO con inmunohistoquímica, citometría de flujo o ultraestructura, negatividad para los marcadores CD3 y CD79 a citoplásmicos, y positividad para los marcadores CD13, CD33, CD11b, CD117, o CD65.
Igualmente es de gran utilidad para la aproximación diagnóstica de las M3 variantes , en las que la presencia de una población neoplásica de tamaño y complejidad homogénea, junto con una pérdida de CD34 sin incremento en la expresión de CD15 y una expresión simultánea en la célula neoplásica de CD117 y CD65 obliga a descartar mediante biología molecular el reordenamiento PML-RARA.
En las M6 , tanto en la forma clásica con >20% de blastos mieloides en la celularidad no eritroide, como en las leucemias eritroides puras consideradas en la clasificación de la OMS, el estudio fenotípico es de gran ayuda en las variantes fenotípicas maduras con expresión de CD71 (receptor de la transferrina) y/o glicoforina A. Las variantes tempranas o inmaduras son inclasificables fenotípicamente.
Las M7 , al igual que las LMA M6, son leucemias poco frecuentes. Su diagnóstico requiere la demostración de >30% de blastos de línea megacariocítica entre la celularidad no eritroide. La confirmación de la línea celular no es posible mediante citología convencional o por citoquímica, y se basa en el estudio inmunofenotípico o mediante la demostración por microscopía electrónica de la peroxidasa plaquetaria. En el análisis por CMF de este subgrupo, los megacariocitos leucémicos expresarían CD61 (GpIIIa) de membrana o citoplásmico, CD41 (GpIIb/IIIa) o CD42 (complejo GpIb/V/IX). Es necesario descartar la presencia de falsos positivos por la adhesión de las plaquetas a los blastos de otras líneas celulares. Para ello puede realizarse el estudio en muestras anticoaguladas con EDTA.Se muestra un caso de LA megacarioblástica en la que más de un 30% de las células no eritroides de la médula ósea son blastos que expresan CD34, CD61 y CD41A.
Imagenes por gentileza del Fondo de Imagen en Hematología de la AEHH
Dentro de las leucemias agudas linfoblásticas (LAL) , el grupo EGIL ha establecido una clasificación inmunológica tanto de las LAL de línea B como de las de línea T basada en la expresión de diferentes antígenos. Dentro de las de línea B, uno de los aspectos más importantes es identificar correctamente las LAL B maduras o BIV. Estas se caracterizan por la expresión de cadenas ligeras en la superficie celular (ocasionalmente en el citoplasma). Aunque se relacionan con el tipo morfológico L3, se han identificado casos sin esta morfología. Su identificación es de gran importancia, ya que su tratamiento y pronóstico es diferente al del resto de las LAL.

También es importante tener en cuenta que ante un cuadro leucémico en adultos con predominio de células de aspecto linfoide con positividad para CD20 y de inmunoglobulinas de superficie y CD10 negativo el diagnóstico posible es el de una variante blastoide de un linfoma del manto cuyo fenotipo será además CD5+ y CD23- con expresión de ciclina D1.
Finalmente el estudio fenotípico mediante CMF permite establecer el diagnóstico de leucemia aguda bifenotípica . El grupo EGIL ha establecido un score asignando a una serie de marcadores diferentes puntos en función de su especifidad para asignar línea. La presencia en una misma célula blástica de dos o más puntos para más de una línea celular establecería el diagnóstico de leucemia aguda bifenotípica, que se describen en la Tabla 1.
Tras la aplicación de baterías amplias de anticuerpos monoclonales, <1% de las LA se clasifican como leucemias agudas indiferenciadas con un fenotipo CD34+ CD38+ HLA-Dr+ CD7+ con negatividad para MPO, CD3c, y CD79a. En estos casos son necesarios los estudios moleculares para asignar línea.